2026年 08期
红花来源外泌体样纳米囊泡通过抑制NF-κB信号通路缓解心肌细胞肥大
张国军;杜忠鹏;王璐;陈俊羽;阮焕钧;罗烨;段玮丽;陈史钰;李腾;柯晓;目的 探究红花来源外泌体样纳米囊泡（CDNVs）是否通过抑制NF-κB信号通路，发挥缓解血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)诱导的心肌细胞（H9C2）肥大的作用及其分子机制。方法 采用超速离心联合蔗糖密度梯度离心法分离提纯CDNVs，通过透射电镜、纳米颗粒追踪技术鉴定其形态与粒径分布。体外培养大鼠H9C2心肌细胞，随机分为空白对照组（NC）、ANGⅡ(1.0μmol/L)组、ANGⅡ+CDNVs组、ANGⅡ+CDNVs+NF-κB activator 1组，干预24 h。采用CCK-8检测细胞活力，qPCR检测心肌肥厚相关基因（ANP、BNP）表达，鬼笔环肽测定细胞相对面积，Western blot检测肥大标志蛋白及NF-κB通路蛋白（P-p65/p65、P-IκBα/IκBα）表达，免疫荧光观察p65核转位；然后加入NF-κB信号通路激动剂activator 1，检测心肌细胞肥大标志蛋白和NF-κB通路蛋白的表达。结果 CDNVs呈典型类圆形囊泡结构，平均粒径140.4 nm，符合外泌体形态特征；浓度为0.1～1.0μmol/L ANGⅡ对心肌细胞活力无显著影响。与NC组相比，ANGⅡ可显著上调ANP、BNP基因表达，增大心肌细胞面积，升高心肌肥大标志蛋白及NF-κB通路蛋白水平，促进p65核转位（P<0.05）;CDNVs干预后，上述指标均较ANGⅡ组显著降低（均P<0.05）；而加入NF-κB激动剂后，上述实验结果均被逆转。结论 CDNVs通过抑制NF-κB信号通路，缓解ANGⅡ诱导的H9C2细胞肥大。
司美格鲁肽调节AMPK/NLRP3信号通路对大鼠冠状动脉微栓塞致心肌损伤的影响
刘阳春;杨华锋;黄万众;黄源;苏强;目的 基于腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路探讨司美格鲁肽（SEM）对大鼠冠状动脉微栓塞（CME）致心肌损伤的影响。方法 选择存活的32只大鼠随机分为假手术（Sham）组、CME组、CME+SEM组、CME+SEM+Compound C(CC,AMPK抑制剂)组，每组8只；将微栓塞球从左心室注入构建CME模型；从左心室注入生理盐水为Sham组；CME+SEM组在CME造模前4周，采用SEM进行皮下注射，剂量为1 mg/kg，每周1次，连续4周；在CME+SEM+CC组中，大鼠在CME造模前接受为期4周的SEM治疗，在CME造模前30 min，通过尾静脉注射给予CC(0.25 mg/kg，溶于无菌水)。各组在造模后24 h分别进行以下检测：应用心脏超声评估心功能；通过HE染色观察心肌组织的病理变化；利用Heidenhain染色测定心肌微梗死面积；采用ELISA法检测血清中心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平；通过Western blot分析心脏组织中AMPK/NLRP3通路相关蛋白的表达情况。结果 与Sham组比较，CME组心功能显著下降，血清cTnT水平显著升高，心肌微梗死面积显著增加（P<0.05）；与CME组比较，CME+SEM组心功能得到显著改善，cTnT水平降低，心肌微梗死面积明显减少（P<0.05）。Sham组心肌组织形态结构正常，未见明显梗死灶；CME组心肌排列疏松，部分细胞核发生核碎裂，核溶解；SEM组心肌变性、水肿及炎症细胞浸润得到缓解。与Sham组比较，CME组p-AMPK/AMPK蛋白比值略有升高，NLRP3、消皮素D-N端（GSDMD-N）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 p20亚基（caspase-1 p20）、白细胞介素（IL）-1β、IL-18等蛋白水平均显著上调（P<0.05）；与CME组比较，CME+SEM组p-AMPK/AMPK蛋白比值进一步增加，NLRP3、GSDMD-N、ASC、caspase-1 p20、IL-1β、IL-18等蛋白水平均显著下降（P<0.05）。结论 SEM能够显著改善CME引发的心肌损伤，其作用机制可能与促进AMPK磷酸化、减少NLRP3炎症小体介导的炎症反应以及细胞焦亡密切相关。
基于转录组学分析慢性低氧对代谢功能障碍相关脂肪性肝炎脂质代谢的影响
宋康;梁宏;马如意;王丽;目的 本研究基于转录组学探讨慢性低氧暴露对小鼠代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）脂质代谢的影响。方法 雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组：对照组（Control，普通饮食），代谢功能障碍相关脂肪性肝炎组（MASH，高脂饮食），低氧代谢功能障碍相关脂肪性肝炎组（CH-MASH，高脂饮食），12周后CH-MASH给予低氧干预（模拟海拔3 800 m）4周。利用转录组测序获得三组小鼠肝脏差异表达基因，进行GO分析和KEGG分析。构建蛋白互作（PPI）网络筛选枢纽基因，同时检测血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）及肝功能指标，HE染色观察肝脏组织形态学变化。结果 与对照组相比，MASH组和CH-MASH组血清中TG和TC明显升高，与MASH组相比，CH-MASH组升高更明显。HE染色提示，与MASH组相比，CH-MASH组脂质程度减轻。CH-MASH组小鼠肝脏转录组学与MASH组比较有明显差异。共筛选出1 005个差异表达基因，GO分析得到包括细胞外区域、膜的固有成分、脂质代谢过程，小分子代谢过程，小分子合成过程等1 153条显著富集条目。KEGG分析获得包括代谢通路、视黄醇代谢通路、PPAR信号通路、固醇合成通路等41条通路。筛选蛋白互作网络中低氧下与脂质代谢有关连接紧密的基因有Acaca,Hmgcs1,Acat2,Cyp51和Msmo1，并进行RT-qPCR验证，结果一致。结论 慢性低氧改变了MASH小鼠肝脏脂质代谢转录水平。本研究筛选出的关键基因和通路为深入研究低氧暴露影响MASH小鼠肝脏代谢改变的机制提供了线索。
一种基于MYD88组成型靶向GD2 CAR THP-1M细胞系的构建
朱梦娟;邱佳琪;陈欣蕾;王帅;周路程;陈义昭;林宁;涂佳杰;目的 获得稳定转染基于髓样分化因子88(MYD88)的二唾液酸神经节苷脂（GD2）的嵌合抗原受体巨噬细胞（CAR-M）。方法 设计并构建Anti-GD2的分化簇3ζ链（CD3ζ）-MYD88 CAR腺病毒载体，用该病毒感染经佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯（PMA）诱导分化的THP-1来源的巨噬细胞（THP-1M），构建含有绿色荧光标记的Anti-GD2 CAR THP-1。通过活细胞工作站检测CAR分子的表达情况，并通过体外共培养实验检测Empty CAR-M组、Anti-GD2 CAR-M(CD3ζ)组和Anti-GD2 CAR-M(CD3ζ-MYD88)组对胶质瘤细胞的吞噬功能，同时分析其极化情况。结果 CAR腺病毒成功转染THP-1，获得Anti-GD2 CAR-M。与胶质瘤细胞共培养后，流式细胞术结果显示，与Empty CAR-M组和Anti-GD2 CAR-M(CD3ζ)组相比，Anti-GD2 CAR-M(CD3ζ-MYD88)组对GD2高表达的T98G细胞吞噬能力增强（P<0.05），同时表现出CD86的上调（P<0.05）。与Empty CAR-M组和Anti-GD2 CAR-M(CD3ζ)组相比，Anti-GD2 CAR-M(CD3ζ-MYD88)组对GD2高表达的T98G细胞吞噬能力增强（P<0.05），同时表现出CD86的上调（P<0.05）组的炎性因子白细胞介素（IL）-6、IL-12的表达升高（P<0.05）。结论 本研究构建了Anti-GD2CAR-M细胞并验证其吞噬活性，证实MYD88的组成型表达能够促进CAR-M的炎性极化，为促炎型CAR-M的开发提供了一种潜在的结构修饰方法。
基于广义相加模型的气象因素对安徽省流感样病例的影响研究
朱梦;吴家兵;龚磊;孙袁芳;孙维;朱标;李淑雯;朱青青;目的 探索气象因素对安徽省流感样病例（ILI）的影响。方法 从“中国流感监测信息系统”中收集2016—2023年安徽省ILI监测数据，气象数据来源于安徽省公共气象服务中心。使用R 4.2. 1作ILI与气象因素的Spearman秩相关分析，并建立广义相加模型（GAM）分析气象因素对ILI的影响。结果 相关分析和GAM结果显示，滞后一周的平均气温、平均相对湿度均对ILI有显著非线性影响（P<0.05），周平均气温在14℃以下时，ILI随气温降低而逐渐增加；周平均相对湿度低于65%时，随着周平均相对湿度降低，ILI逐渐增多。5～14岁、15～24岁、25～59岁的ILI变化受气象因素影响，与周平均气温或周平均相对湿度存在非线性关系。结论 周平均气温、周平均相对湿度是影响安徽省ILI的主要因素，且存在滞后性，可为流感监测预警提供参考。
儿童肝移植术后巨细胞病毒感染患儿外周血IL-18和Th1的变化及意义
高一文;刘纯;李丹;穆佳玮;王玉亮;目的 探讨儿童肝移植术后巨细胞病毒(CMV)感染患儿外周血白细胞介素(IL)-18和CD3~+CD8~-T辅助细胞(Th)1、Th2水平的变化。方法 收集行儿童肝移植患儿40例，根据术后是否发生CMV感染分为CMV组(20例)和未感染组(20例)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆IL-18水平，应用流式细胞术检测外周血CD3~+CD8~-T淋巴细胞中IFN-γ(Th1)和IL-10(Th2)表达率。结果 CMV组血浆IL-18水平明显高于未感染组(P<0.01)。CMV组Th1表达率明显低于未感染组(P<0.01),Th2表达率与未感染组相比差异无统计学意义。IL-18水平与Th1呈负相关(P<0.05)。结论 肝移植术后CMV感染患儿外周血IL-18升高及Th1极化失衡，参与了CMV感染的发病机制。
孕中期母体血清学生物标志物浓度与胎儿携带拷贝数变异风险的相关性研究
张梦汀;李丹丹;高越;吴东;肖海;郭梁洁;王红丹;目的 探究孕中期母体血清学标志物游离β-人绒毛膜促性腺激素（fβ-hCG）、甲胎蛋白（AFP）、游离雌三醇（uE3）和抑制素A(INH A)的浓度与胎儿携带拷贝数变异（CNV）风险的相关性。方法 回顾单纯孕中期母体血清学四联筛查高风险就诊行介入性产前诊断，同时进行染色体核型分析和比较基因组杂交（aCGH）或者低深度全基因组测序（CNV-seq）的病例结果，统计分析不同检测方法的检出率。同时将用于筛查的血清学标志物浓度分为异常浓度低组、正常组和异常浓度高组，统计分析不同的血清学标志物浓度组对应的胎儿CNV情况。结果 1 516例孕中期血清学四联筛查高风险病例行产前诊断后，染色体核型共检出59例异常，而aCGH/CNV-seq检出87例异常，检出率差异有统计学意义。与核型分析结果相比，aCGH/CNV-seq额外检出胎儿CNV异常46例，但未检出18例染色体结构异常。1 457例核型结果正常的病例中，fβ-hCG浓度异常的病例最多，其次是INH A和uE3,AFP浓度异常的病例最少。当母体uE3浓度低于孕周中位数0.5倍时，胎儿携带CNV的风险与uE3浓度正常时对应的胎儿CNV的结果相比，存在显著性差异。而fβ-hCG组、AFP组和INH A组差异无统计学意义。结论 母体血清学uE3浓度低于孕周中位数0.5倍与胎儿携带异常CNV的风险增加相关。
女性不同体质量指数影响IVF/ICSI结局的分析
张惠茹;张媛媛;尹奕琪;周平;目的 探讨女性不同体质量指数（BMI）与体外受精/卵胞质内单精子注射（IVF/ICSI）助孕过程关键指标的相关性及其对产科结局的影响。方法 回顾性分析接受IVF/ICSI治疗的患者资料，采用倾向性得分匹配平衡组间差异后，入组周期19 834例。依据中国人群BMI标准并延伸，将患者分为：极低体质量组（BMI<16）、偏低体质量组（16.0≤BMI<18.5）、正常体质量组（18.5≤BMI<24.0）、超重组（24.0≤BMI<28.0）和肥胖组（BMI≥28.0）。比较5组患者的基本情况、促排方案及过程、助孕结局。另外，后期随访到75例已分娩且有并发症的患者，分析BMI影响妊娠期并发症的关联性。结果 5组患者一般资料比较中，各组间年龄、不孕年限、双窦卵泡数等基本情况的差异均无统计学意义。促排方案及过程比较中，各组间IVF卵子数的差异有统计学意义（P<0.001），正常组显著高于超重组和肥胖组。助孕结局比较中，生化妊娠率、出生缺陷率的差异无统计学意义。各组间累积活产率的差异有统计学意义（P<0.05），超重组显著高于正常组。随访到的75例患者中，妊娠期高血压25例，妊娠合并糖尿病22例（两种并发症中超重和肥胖分别占60.00%、45.40%）。结论 女性不同BMI与IVF/ICSI结局存在显著关联。极低体质量患者孕前体质量评估应予以重视；超重和肥胖患者的活产率较正常体质量组相当，但仍建议这类人群治疗前积极减重，减少流产、早产和妊娠并发症的发生率。
生长激素预处理对卵巢储备功能减退患者IVF/ICSI-ET临床结局的影响
韩丹;徐祖滢;汪诗羽;倪小晴;周平;曹云霞;目的 研究生长激素（GH）预处理对卵巢储备功能减退（DOR）患者行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植技术（IVF/ICSI-ET）助孕临床结局的影响。方法 回顾性分析359例DOR患者行IVF/ICSI-ET助孕的临床资料，按照促排卵之前是否使用GH预处理及仅在促排卵过程中添加或不添加GH分成3组：促排卵前及促排卵过程中均未使用GH者为对照组（n=119）；促排卵前未使用GH预处理，但促排卵过程中添加GH 4 IU/d者为非GH预处理组（n=115）；促排卵前4～6周使用GH 2IU/d预处理，且促排卵过程中使用GH 4 IU/d者为GH预处理组（n=125）。观察比较3组患者基本资料、促排卵相关资料、胚胎情况及累积活产率（CLBR）。结果 (1) 3组患者女方年龄、男方年龄、不孕年限、体质量指数（BMI）、基础性激素水平、不同促排卵方案占比、HCG日内膜厚度、雌二醇（E2）、黄体生成素（LH）水平、每周期移植囊胚数差异均无统计学意义。(2) GH预处理组促性腺激素（Gn）使用总剂量、Gn总天数显著少于对照组与非GH预处理组（P<0.05）;GH预处理组获卵数、成熟卵子数、双原核（2PN）受精数、2PN卵裂数、可移植囊胚数、优质囊胚数、累积临床妊娠率、CLBR均显著高于对照组（P<0.05）；与非GH预处理组相比，GH预处理组可移植囊胚数、优质囊胚数、CLBR均显著增多（P<0.05）。(3)与对照组相比，非GH预处理组仅获卵数明显增多（P<0.05），但成熟卵子数、2PN受精数、2PN卵裂数、可移植囊胚数、优质囊胚数、累积临床妊娠率、CLBR差异均无统计学意义。结论 对于DOR患者，促排前使用GH预处理4～6周可以改善获卵数、胚胎质量，提高累积临床妊娠率、CLBR，改善体外受精胚胎移植助孕的临床结局。
儿童肺炎支原体肺炎并发塑形性支气管炎的临床特征及危险因素分析
丁俊丽;李娇;周建涛;顾骏纬;徐晨阳;朱玉林;侯舒;吴淑娟;丁圣刚;目的 探讨儿童肺炎支原体肺炎(MPP)并发塑形性支气管炎(PB)的危险因素，并构建预测模型。方法 采用倾向性评分匹配(1∶4最近邻匹配)平衡两组基线资料。通过单因素及多因素Logistic回归分析独立危险因素，并运用多种机器学习算法构建预测模型，以受试者工作特征曲线、决策曲线及校准曲线评价模型效能，采用沙普利可加解释方法(SHAP)进行模型解释。结果 匹配后两组基线具有可比性。PB组发热时长、胸腔积液发生率、右肺上叶受累率及降钙素原(PCT)、D-二聚体、乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、免疫球蛋白E(IgE)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中红细胞计数均高于非PB组(P<0.05)，血淋巴细胞及嗜酸性粒细胞计数低于非PB组(P<0.05)。多因素Logistic回归显示，PCT>0.207μg/L、LDH>386.25 U/L、右肺上叶受累、BALF红细胞计数>1 500×106是独立危险因素。机器学习中，梯度提升机(GBM)模型在验证集曲线下面积为0.786，泛化能力最优。SHAP分析验证了上述变量的重要性。结论 PCT>0.207μg/L、LDH>386.25 U/L、右肺上叶受累、BALF红细胞计数>1 500×106对PB发生具有独立预测价值，GBM模型具备一定临床风险分层能力。