南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科;安徽医科大学第一附属医院肝胆胰及移植外科;
目的 探究尿刊酸酶(UROC1)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其对HCC发生发展的影响。方法 分析蛋白质质谱和TCGA数据库中UROC1在癌和癌旁组织中的表达及预后数据。利用免疫组织化学染色、实时定量PCR(qPCR)和Western blot实验验证HCC中UROC1表达情况。利用HE染色判断肿瘤分化水平，分析UROC1表达水平与其相关性。构建稳定过表达UROC1和其突变体的Hep3B、LM3细胞系，开展体外细胞表型实验。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)、平板克隆实验、EdU实验、划痕实验和Transwell实验探究UROC1对HCC细胞增殖和迁移的影响。结果 TCGA数据库分析结果显示，与癌旁组织相比，UROC1在HCC组织中普遍下调(P<0.000 1),UROC1低表达组较高表达组的患者预后更差(P<0.05)。免疫组织化学染色及评分、qPCR和Western blot实验验证了UROC1在HCC中低表达。不同分化水平癌组织的免疫组织化学染色结果提示分化越差的HCC组织中UROC1表达水平越低(P<0.05)。平板克隆实验结果显示，过表达UROC1的细胞克隆形成数目较对照组明显减少。CCK-8和EdU染色实验结果显示，UROC1过表达的细胞增殖速度显著低于对照组(P<0.001)。划痕实验结果显示，UROC1过表达的HCC细胞迁移距离明显小于对照组细胞(P<0.000 1)。Transwell实验显示，过表达UROC1后细胞穿过小室的数目显著减少(P<0.000 1)。但是UROC1的活性位点突变后上述实验表型的结果和对照组趋于一致。结论 UROC1在HCC组织中低表达，在HCC细胞中过表达UROC1可能对细胞增殖和迁移能力有抑制作用。
| 145 | 0 | 19 |
| 下载次数 | 被引频次 | 阅读次数 |
[2] Llovet J M,Ricci S,Mazzaferro V,et al.Sorafenib in advanced hepatocellular carcinoma[J].N Engl J Med,2008,359(4):378-90.
[3] Kudo M,Finn R S,Qin S,et al.Lenvatinib versus sorafenib in first-line treatment of patients with unresectable hepatocellular carcinoma:a randomised phase 3 non-inferiority trial[J].Lancet,2018,391(10126):1163-73.
[4] Bruix J,Qin S,Merle P,et al.Regorafenib for patients with hepatocellular carcinoma who progressed on sorafenib treatment (RESORCE):a randomised,double-blind,placebo-controlled,phase 3 trial[J].Lancet,2017,389(10064):56-66.
[5] Mossmann D,Muller C,Park S,et al.Arginine reprograms metabolism in liver cancer via RBM39[J].Cell,2023,186(23):5068-83.e23.
[6] Brosnan M E,Brosnan J T.Histidine metabolism and function[J].J Nutr,2020,150(Suppl 1):2570S-5S.
[7] Kanarek N,Keys H R,Cantor J R,et al.Histidine catabolism is a major determinant of methotrexate sensitivity[J].Nature,2018,559(7715):632-6.
[8] Espinos C,Pineda M,Martinez-Rubio D,et al.Mutations in the urocanase gene UROC1 are associated with urocanic aciduria[J].J Med Genet,2009,46(6):407-11.
[9] Jensen E C.Quantitative analysis of histological staining and fluorescence using Image J[J].Anat Rec (Hoboken),2013,296(3):378-81.
[10] Varghese F,Bukhari A B,Malhotra R,et al.IHC Profiler:an open source plugin for the quantitative evaluation and automated scoring of immunohistochemistry images of human tissue samples[J].PLoS One,2014,9(5):e96801.
[11] Jiang Y,Sun A,Zhao Y,et al.Proteomics identifies new therapeutic targets of early-stage hepatocellular carcinoma[J].Nature,2019,567(7747):257-61.
[12] Glinton K E,Levy H L,Kennedy A D,et al.Untargeted metabolomics identifies unique though benign biochemical changes in patients with pathogenic variants in UROC1[J].Mol Genet Metab Rep,2019,18:14-8.
[13] Yang L,Venneti S,Nagrath D.Glutaminolysis:a hallmark of cancer metabolism[J].Annu Rev Biomed Eng,2017,19:163-94.
基本信息:
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2024.08.008
中图分类号:R735.7
引用信息:
[1]严洪遥,劳远翔,孙倍成.UROC1在肝细胞癌中的表达及对肿瘤发生的影响[J].安徽医科大学学报,2024,59(08):1339-1346.DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2024.08.008.
基金信息:
国家自然科学基金(编号：81930086、82120108012);; 安徽省高校科研项目(编号：2022AH010070);; 安徽省临床医学研究转化专项(编号：202204295107020008)