文献
肝癌免疫治疗的挑战与机遇
孙倍成;肝癌在全球范围内是第六大最常见的癌症类型，同时也是导致癌症死亡的第三大原因。约有30%的患者在诊断时处于肝癌早期阶段，此时可以通过包括肝部分切除术和肝移植在内的治愈性治疗手段进行治疗，使得患者的中位总生存期能够超过60个月。然而，大多数患者在被确诊时已进展至肝癌晚期，此时的治疗选项常可采用靶向治疗和免疫检查点抑制剂。尤其是包含免疫检查点抑制剂的系统性治疗，在显著改善晚期肝癌患者的预后方面可发挥重要作用。因此，深入探索肝癌的免疫微环境特征，积极识别免疫治疗的生物标志物，对于推进和完善肝癌免疫治疗至关重要。
不同妊娠方式妊娠期宫颈息肉摘除术后妊娠结局的分析
王影;董雨洁;吴荣;胡晶晶;杨文娟;吴潇;魏兆莲;目的 比较不同妊娠方式妊娠期宫颈息肉摘除术后的妊娠结局。方法 收集入院行妊娠期宫颈息肉摘除术的孕妇125例。按妊娠方式不同分为自然妊娠组(n=71例),体外受精-胚胎移植组(IVF-ET组，n=54例),回顾性分析孕妇年龄、怀孕孕次、生产产次、流产次数、不良妊娠史、子宫内膜息肉史、发现宫颈息肉前是否有阴道流血、宫颈息肉摘除时的孕周、息肉数目、术后病理学检查及妊娠结局等临床资料。结果 妊娠期宫颈息肉最常出现的症状是异常阴道流血，共有111例，约占88.8%(自然妊娠组有62例，发生率87.32%,IVF-ET组有49例，发生率为90.74%);部分患者出现分泌物增多或妇科检查时发现，共占11.2%。本研究所有患者均行宫颈息肉摘除，手术后13例发生流产(自然妊娠组7例，IVF组6例),10例早产(自然妊娠组6例，IVF组4例),93例孕足月分娩，约占74.4%(自然妊娠组54例，IVF组=39例),9例妊娠中(自然妊娠组4例，IVF-ET组5例);术后病理：炎性息肉105例，占84%,蜕膜息肉20例，占8%(自然妊娠组和IVF-ET组各10例，发生率分别为14.09%和18.52%)。IVF-ET组术前阴道流血发生率、蜕膜息肉发生率、术后流产及术后早产发生率均高于自然妊娠组，但差异无统计学意义。结论 自然妊娠组患者和IVF-ET组患者行妊娠期宫颈息肉摘除术，两组患者的妊娠结局无明显差别。
SQLE敲除促进黑色素瘤肿瘤微环境CD8~+ T细胞浸润发挥抗肿瘤效应
丁瑶;刘雯;廖亦然;雷舜;张妍;陈叶梓;龚奕;黄启钊;目的 探讨黑色素瘤细胞鲨烯环氧合酶(SQLE)基因敲除调控肿瘤微环境T细胞浸润影响机体抗肿瘤效应的作用及其分子机制。方法 使用SQLE敲除的B16F10细胞系分别接种免疫完全和免疫缺陷小鼠，明确基因敲除对肿瘤细胞恶性表型的自主和非自主性调控，进一步使用抗体阻断、Luminex多因子检测和流式细胞等技术探索SQLE基因敲除对细胞因子/趋化因子分泌及免疫浸润的影响，结合生物信息学分析，验证SQLE表达与免疫浸润和临床预后的相关性。结果 与免疫缺陷型小鼠相比，敲除SQLE显著抑制免疫完全小鼠肿瘤增殖，延长小鼠生存期。SQLE敲除诱导肿瘤细胞分泌细胞因子和趋化因子，增加肿瘤微环境CD8~+ T细胞浸润从而改善机体抗肿瘤效应。生物信息学分析提示SQLE及其对应的免疫浸润标志物与黑色素瘤患者临床预后明显相关。结论 SQLE通过细胞因子和趋化因子调控肿瘤微环境参与机体抗肿瘤效应，有望成为新的肿瘤免疫药物靶点和疗效预测分子指标。
规范化淋巴结分拣对胃食管结合部恶性肿瘤手术治疗的效果
何辉虎;高凯绩;孙家和;姚启杨;张士杰;耿灵钧;目的 探讨手术后规范淋巴结分拣对胃食管结合部恶性肿瘤手术疗效的影响。方法 回顾性分析医院外科胃癌数据库中所有胃食管结合部恶性患者资料，根据手术后是否有外科医生立即进行淋巴结分拣，将患者分为淋巴结分拣组(分拣组)和淋巴结未分拣组(未分拣组);一般资料包括性别、年龄、体质量指数(BMI)、癌胚抗原(CEA)、术前白蛋白水平、术前血红蛋白等，围术期及病理资料包括手术时间、术中出血量、术后住院时间、肿瘤分化程度、肿瘤距上切缘距离、淋巴结总数、阳性淋巴结数等；使用Kaplan-Meier曲线和Log-rank检验进行生存分析，倾向性评分匹配分析调整组间混杂因素。结果 共纳入患者386例，淋巴结分拣组、未分拣组分别为133、253例，中位随访时间40.18月；分拣组淋巴结总数、阳性淋巴结数分别为(26.38±12.18)、(6.63±10.14)枚，未分拣组淋巴结总数、阳性淋巴结数分别为(12.25±7.06)、(3.07±3.77)枚，淋巴结分拣组与未分拣组在淋巴结总数、阳性淋巴结数差异均有统计学意义(P<0.05),未匹配前分拣组和未分拣组生存差异无统计学意义；两组进展期胃癌患者分别为112、203例，分拣组患者总体生存曲线优于未分拣组，中位生存时间差异有统计学意义(P<0.05);将卡钳值设置为0.02,倾向性匹配94对患者，匹配后分拣组淋巴结总数、阳性淋巴结数分别为(24.71±12.03)、(5.70±9.95)枚，未分拣组淋巴结总数、阳性淋巴结数分别为(13.05±7.63)、(3.37±4.32)枚，两组差异有统计学意义(P<0.05),分拣组患者总体生存曲线优于未分拣组，中位生存时间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 胃癌术后淋巴结分拣可显著提高总淋巴结、阳性淋巴结送检数目，降低淋巴结迁移，改善术后生存时间。
汉黄芩素对脂多糖诱导的急性肾损伤小鼠的保护作用
王锦妮;汪靓婧;王美茜;吴永贵;齐向明;目的 探讨汉黄芩素(WOG)对脂多糖(LPS)诱导的急性肾损伤的保护作用。方法 用LPS试剂诱导C57BL/6J小鼠构建脓毒症致急性肾损伤模型。以未经处理的C57BL/6小鼠作为常规对照组。24只小鼠被随机分配到四个组别：常规对照(NC)组、WOG(WOG 12.5 mg/kg)组、LPS(LPS 10 mg/kg)组以及LPS+WOG(LPS 10 mg/kg+WOG 12.5 mg/kg)组。检测小鼠血肌酐(CRE)和尿素氮(BUN)水平。聚合酶链式反应(PCR)检测小鼠肾损伤分子1(KIM-1)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的表达情况。苏木精-伊红(HE)染色和糖原(PAS)染色观察肾脏病理损伤程度。免疫组化检测肾组织的炎性标志物白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达程度。Western blot法检测肾脏组织核因子κB(NF-κB)信号通路亚基P65和PP65蛋白表达变化的情况。结果 相较于NC组，LPS组CRE和BUN上升(F_(CRE)=60.90,P<0.001;F_(BUN)=82.13,P<0.001);相较于LPS组，LPS+WOG组CRE和BUN降低(P<0.001)。PCR检测结果显示，相对于NC组，LPS处理的小鼠其肾脏内的KIM-1和NGAL mRNA表达增加(F_(KIM-1)=146.3,F_(NGAL)=161.2,均P<0.001),而在LPS+WOG组中，KIM-1和NGAL mRNA表达下降(均P<0.01)。肾脏组织病理学检查显示，与NC组相比，LPS组小鼠肾组织肾小管扩张明显、炎症细胞浸润；与LPS组相比，LPS+WOG组肾小管扩张数量减少和炎症细胞浸润减少(F_(HE)=721.4,F_(PAS)=518.9,P<0.001)。免疫组化染色检测结果显示，相较于NC组，LPS处理的小鼠中IL-1β、IL-6及TNF-α的表达量上升(F_(IL-1β)=114.6,F_(IL-6)=108.9,F_(TNF-α)=251.6,均P<0.001);而对比LPS组，LPS+WOG组中的这些指标则有所减少(均P<0.01)。使用Western blot方法进一步研究表明，相较于NC组，LPS处理的小鼠其NF-κB信号途径已被激活并产生高磷酸化状态(F_(PP65)=13.02,P<0.01),然而对比LPS组时，LPS+WOG组的该路径却表现出相反的效果，即活性减弱且磷酸化程度降低(P<0.01)。结论 WOG能有效地阻断LPS引发的急性肾损伤模型小鼠的NF-κB信号途径，从而削弱由LPS引起的急性肾损伤小鼠肾脏的炎性应答及其组织损害。
肿瘤微环境中细胞外囊泡释放对肿瘤免疫的影响
黎劼潇;陆枢桠;张佳宁;唐科;明洁;肿瘤微环境(TME)是一张编织极为复杂的网络，肿瘤细胞、基质细胞和免疫细胞通过细胞间的直接接触或细胞因子的旁分泌信号互相影响，形成了复杂的细胞间通讯系统。而近年来，基于细胞外囊泡(EV)的细胞间通讯已成为日益重要的通讯方式。EV可通过传递生物活性物质或通过其表面的配体影响所接触的各种细胞，进而使肿瘤免疫微环境发生巨大变化。因此，整合EV与免疫系统的相互作用和联系对于EV在基础研究和临床实践中的应用具有重要意义。该文综述了TME中不同来源的EV在肿瘤免疫调控中的作用，具体分析了EV在肿瘤免疫调控过程中的作用，旨在为临床肿瘤疾病的诊断和治疗提供新思路。
麻黄碱调控TGF-β1/Smads通路对支气管哮喘小鼠气道重塑的影响
范慧慧;任玉梅;田新磊;张凯;李晓丽;目的 探究麻黄碱对支气管哮喘小鼠气道重塑的影响及对转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads通路的调控作用。方法 将所有小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组、麻黄碱低剂量组、麻黄碱高剂量组、麻黄碱高+TGF-β1激活剂组，每组12只。除对照组，其余组小鼠腹腔注射含有40μg卵清蛋白(OVA)和2 mg 10%氢氧化铝的致敏液诱导哮喘模型。8周后，检测各组小鼠气道高反应性；对支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞进行计数；ELISA检测BALF中白细胞介素(IL)-4、IL-5和IL-13的水平；苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察小鼠肺组织的病理学变化及胶原纤维面积；免疫组织化学检测小鼠肺组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达；Western blot检测小鼠肺组织中TGF-β1/Smads通路相关蛋白的表达。结果 与对照组相比，模型组小鼠不同乙酰甲胆碱剂量下的气道高反应性、气道壁的总面积(Wat)/基底膜的周长(Pbm)比值、胶原纤维面积、嗜酸性粒细胞及IL-4、IL-5、IL-13含量、α-SMA、TGF-β1表达及p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3比值均升高(P<0.05),Smad7表达降低(P<0.05);与模型组相比，地塞米松组和麻黄碱低、高剂量组小鼠不同乙酰甲胆碱剂量下的气道高反应性、Wat/Pbm比值、胶原纤维面积、嗜酸性粒细胞及IL-4、IL-5、IL-13含量、α-SMA、TGF-β1表达及p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3比值均降低(P<0.05),Smad7表达升高(P<0.05);与麻黄碱高剂量组相比，麻黄碱高+TGF-β1激活剂组小鼠不同乙酰甲胆碱剂量下的气道高反应性、Wat/Pbm比值、胶原纤维面积、嗜酸性粒细胞及IL-4、IL-5、IL-13含量、α-SMA、TGF-β1表达及p-Smad2/Smad2、pSmad3/Smad3比值均升高(P<0.05),Smad7表达降低(P<0.05)。结论 麻黄碱可以改善支气管哮喘小鼠的气道重塑，其机制与调控TGF-β1/Smads信号通路有关。
UROC1在肝细胞癌中的表达及对肿瘤发生的影响
严洪遥;劳远翔;孙倍成;目的 探究尿刊酸酶(UROC1)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其对HCC发生发展的影响。方法 分析蛋白质质谱和TCGA数据库中UROC1在癌和癌旁组织中的表达及预后数据。利用免疫组织化学染色、实时定量PCR(qPCR)和Western blot实验验证HCC中UROC1表达情况。利用HE染色判断肿瘤分化水平，分析UROC1表达水平与其相关性。构建稳定过表达UROC1和其突变体的Hep3B、LM3细胞系，开展体外细胞表型实验。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)、平板克隆实验、EdU实验、划痕实验和Transwell实验探究UROC1对HCC细胞增殖和迁移的影响。结果 TCGA数据库分析结果显示，与癌旁组织相比，UROC1在HCC组织中普遍下调(P<0.000 1),UROC1低表达组较高表达组的患者预后更差(P<0.05)。免疫组织化学染色及评分、qPCR和Western blot实验验证了UROC1在HCC中低表达。不同分化水平癌组织的免疫组织化学染色结果提示分化越差的HCC组织中UROC1表达水平越低(P<0.05)。平板克隆实验结果显示，过表达UROC1的细胞克隆形成数目较对照组明显减少。CCK-8和EdU染色实验结果显示，UROC1过表达的细胞增殖速度显著低于对照组(P<0.001)。划痕实验结果显示，UROC1过表达的HCC细胞迁移距离明显小于对照组细胞(P<0.000 1)。Transwell实验显示，过表达UROC1后细胞穿过小室的数目显著减少(P<0.000 1)。但是UROC1的活性位点突变后上述实验表型的结果和对照组趋于一致。结论 UROC1在HCC组织中低表达，在HCC细胞中过表达UROC1可能对细胞增殖和迁移能力有抑制作用。
同源细胞微移植技术联合A型肉毒毒素促进毛发再生的实验研究
朱秋璇;宋采滢;程盛荣;陈文东;朱飞;目的 探索同源细胞微移植(MG)技术及A型肉毒毒素(BTX-A)联合使用对小鼠毛发再生的影响。方法 选取45只C57BL/6小鼠，随机分为生理盐水组(NS组)、MG组(MB-0组)、MG+低剂量BTX-A组(MB-2组)、MG+中剂量BTX-A组(MB-10组)、MG+高剂量BTX-A组(MB-50组),共5组，用药后观察小鼠背部毛发生长情况，并在实验第7、14、21天采用苏木精-伊红(HE)染色评估毛囊生长情况、在第21天采用免疫组织化学染色评估血管内皮生长因子(VEGF)及β-catenin的表达情况。结果 经过MG及BTX-A治疗后，小鼠皮肤变黑时间缩短(P<0.05),第14天新生毛发覆盖率增高(P<0.05)。与NS组比较，其余各实验组毛囊数目增多(P<0.05),VEGF及β-catenin表达增多。结论 MG联合BTX-A对小鼠毛发再生有促进作用，其机制可能和促进血管生长及激活β-catenin信号有关。