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大黄素促牙髓细胞成牙本质向分化与CD44/ERK的相关性
张晓蕾;李午丽;王元银;目的 探讨大黄素在脂多糖(LPS)诱导的人牙髓细胞(HDPCs)成牙本质向分化中的作用。方法 分离培养HDPCs，不同浓度的LPS、大黄素预处理HDPCs，Western blot检测细胞中成牙本质向分化相关基因ALP、RUNX2、DMP-1、DSPP的蛋白表达水平；生物信息学、小干扰RNA (si-RNA) 转染技术，分析并验证大黄素的下游细胞信号通路及作用靶点。结果 与LPS组相比，大黄素组ALP、RUNX2、DMP-1、DSPP的蛋白表达水平上升(P<0.05)；GO和KEGG富集分析显示，MAPK信号通路富集最显著；Western blot结果显示，与OIM+LPS组相比，OIM+LPS+Emodin组的p-ERK/ERK表达量上升(P<0.05)。生物信息学筛选出与大黄素在炎症环境下促进HDPCs成牙本质分化相关的前10个核心基因，包括CD44、ITGB2、SP1、TLR2、CCL2、CCL5、ITGAX、CD86、ICAM1、SYK。RT-qPCR结果显示，与CON组相比，OIM组CD44基因的mRNA表达量上升(P<0.01)。敲低CD44表达后，与si-NC组相比，si-CD44组ALP、RUNX2、DMP-1、DSPP的蛋白表达水平降低(均P<0.05)。结论 大黄素可显著促进LPS诱导的人牙髓细胞成牙本质向分化，其调控作用与上调CD44表达、激活ERK信号通路密切相关。
仿生超疏水牙科修复树脂材料的构建及其性能研究
杨玉瑾;郑顺丽;目的 评价仿生超疏水牙科修复树脂材料(BSDRM)的表面性能、力学性能、生物相容性及抑制蛋白/细菌粘附能力。方法 通过对纳米ZrO2进行氟硅烷(FAS)修饰得到FAS-ZrO2，将其与纳米SiO2共同引入由双酚-A双甲基丙烯酸缩水甘油酯(Bis-GMA)、三乙二醇二甲基丙烯酸酯(TEGDMA)、全氟烷基丙烯酸酯(FMA)及光引发体系构成的树脂基体中，制备BSDRM。采用FTIR、XPS、FE-SEM、AFM表征材料化学结构与表面形貌，测定水接触角、滚动角、表面能等润湿性参数，评价维氏硬度、径向拉伸强度及压缩强度等力学性能。通过CCK-8法与细胞染色评价生物相容性，以黏蛋白吸附实验和变形链球菌黏附实验分别评估其抑制蛋白吸附与细菌黏附的性能。结果傅里叶变换红外光谱(FTIR)与X射线光电子能谱(XPS)证实FAS成功接枝于ZrO2表面；BSDRM表面呈现微-纳米复合粗糙结构，水接触角达152.97°±1.64°，滚动角低至7.37°±1.91°，表面能仅为(1.20±0.26)mN/m。力学测试显示，BSDRM硬度显著高于亲水树脂修复材料与商用窝沟封闭剂(P<0.001)，压缩强度与窝沟封闭剂无显著差异。CCK-8与细胞染色结果显示，BSDRM对L929细胞无细胞毒性，且细胞形态完整。抑制蛋白吸附实验中，BSDRM表面的黏蛋白吸附量最低(P<0.001)；抑制细菌粘附的实验中，BSDRM表面变形链球菌黏附量显著少于对照组(P<0.01)。结论 成功构建了BSDRM，该材料兼具优异的超疏水性能、良好的力学性能、生物相容性及显著的抑制蛋白吸附与细菌粘附能力，有望通过抑制菌斑形成降低龋病发生风险，为龋病防治提供新材料策略。
PADI4负向调控中性粒细胞MMP-14/17/25表达在系统性红斑狼疮中的机制
罗颖;汪晓庆;马洁;周强;目的 探究肽基精氨酸脱亚胺酶4（PADI4）对基质金属蛋白酶（MMPs）表达的调控机制及其在系统性红斑狼疮（SLE）发展中的潜在作用。方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测SLE患者与健康对照（HC）组MMP-14/17/25的mRNA表达水平，应用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定其血清蛋白水平。Spearman秩相关分析评价MMPs水平与SLE患者临床指标的相关性。利用PADI4抑制剂GSK484处理原代中性粒细胞，或在PADI4敲减的中性粒细胞样HL-60细胞（dHL-60）中检测MMPs表达水平变化，并通过细胞划痕实验评估细胞迁移能力。结果 SLE患者中性粒细胞MMP-14/17/25的mRNA表达低于HC组（均P<0.01）。血清MMP-14/17/25表达低于HC组（均P<0.01）。MMP-14水平与免疫球蛋白G（IgG）（r=-0.266）、免疫球蛋白A（IgA）（r=-0.286）、球蛋白（GLB）（r=-0.269）呈负相关（均P<0.05），MMP-17水平（r=-0.269）及MMP-25水平（r=-0.244）与尿蛋白（UTP）均呈负相关（均P<0.05）。GSK484（10 μmol/L）抑制PADI4活性后，与对照组相比，中性粒细胞MMP-14/17/25蛋白表达水平上调（均P<0.05），同时细胞划痕迁移率增加（P<0.01）。敲减PADI4表达后，MMP-14/17/25 mRNA表达水平较对照组上调（均P<0.05）。结论 MMP-14/17/25在SLE患者中性粒细胞和血清中低表达，受PADI4负向调控。PADI4可能通过抑制MMPs表达削弱细胞迁移功能，进而参与SLE疾病发展。MMPs或可作为SLE病情监测及靶向干预的潜在新靶点。
内质网应激与肺动脉高压：从病理机制到靶向干预的新视角
曹煜熙;薛志峰;周思仪;刘先胜;肺动脉高压（PH）是一种以肺血管压力进行性升高为主要特征，并最终导致右心功能障碍甚至衰竭的致命性疾病。其核心病理改变为肺小动脉的异常收缩和血管重构。近年来，内质网应激（ERS）作为细胞应对内外环境压力下产生的关键适应性反应，在PH的发生与发展中发挥关键作用。ERS通过激活肌醇需求酶1α（IRE1α）、RNA样ER激酶（PERK）和活化转录因子6（ATF6）等主要信号通路，直接参与调控PH中细胞的生物学行为异常改变和血管重构等病理过程。本文拟系统探讨ERS在PH发病机制中的具体作用，并分析其作为潜在治疗策略的可行性，以期为PH的临床干预提供新的理论依据。
SYT1在肝癌中的表达及临床价值：基于生物信息学与实验
陈骑东;韩红彪;凌潜龙;周帅;秦锡亮;刘会春;金浩;目的探讨突触结合蛋白1(SYT1)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床价值。方法生物信息学检索SYT1亚细胞定位和在肿瘤微环境(TME)中的表达及预测其对HCC进展的生物学功能。UALCAN、TIMER3.0、HPA数据库与IHC验证SYT1在HCC组织中的表达并分析其与MKI67相关性。联合GEPIA2、TIMER3.0数据库及R语言分析，探究SYT1表达水平与HCC患者预后关联并开展生存分析。利用慢病毒进行SYT1基因沉默并采用集落形成、EdU、细胞划痕及Transwell实验探究SYT1对HCC细胞生物学行为的影响。裸鼠成瘤实验验证SYT1的促癌作用。结果生物信息学预测显示SYT1定位于细胞膜与胞质且其家族基因表达以正相关为主。在HCC组织中SYT1表达显著上调(P=2.93×10-10)且与MKI67呈正相关(ρs=0.419，P=3.3×10-17)。生存分析表明，在HCC中SYT1高表达预示着较差的总生存期(P=0.015)与疾病特异性生存期(P=0.0462)。免疫特征分析显示，SYT1在TME的单核/巨噬细胞、B细胞及恶性细胞等中呈高表达。富集分析显示SYT1可能参与多条HCC进展相关通路(P<0.05)。IHC表明SYT1在HCC组织中染色程度上调(P<0.0001)。细胞实验表明，沉默SYT1抑制HCC细胞增殖、迁移、侵袭(P<0.01)；动物实验表明，敲低SYT1可抑制肿瘤生长(P<0.001)。结论SYT1在HCC中表达上调且与不良预后密切相关，可促进HCC细胞增殖、迁移、侵袭及体内肿瘤生长，有望成为HCC临床治疗潜在新靶点。
女性不同体质量指数影响IVF/ICSI结局的分析
张惠茹;张媛媛;尹奕琪;周平;摘要目的 探讨女性不同体质量指数（BMI）与体外受精/卵胞质内单精子注射（IVF/ICSI）助孕过程关键指标的相关性及其对产科结局的影响。方法 回顾性分析接受IVF/ICSI治疗的患者资料，采用倾向性得分匹配平衡组间差异后，入组周期19834例。依据中国人群BMI标准并延伸，将患者分为：极低体质量组（BMI<16）、偏低体质量组（16.0≤BMI＜18.5）、正常体质量组（18.5≤BMI＜24.0）、超重组（24.0≤BMI＜28.0）和肥胖组（BMI≥28.0）。比较5组患者的基本情况、促排方案及过程、助孕结局。另外，后期随访到75例已分娩且有并发症的患者，分析BMI影响妊娠期并发症的关联性。结果 5组患者一般资料比较中，各组间年龄、不孕年限、双窦卵泡数等基本情况的差异均无统计学意义。促排方案及过程比较中，各组间IVF卵子数的差异有统计学意义（P<0.001），正常组显著高于超重组和肥胖组。助孕结局比较中，生化妊娠率、出生缺陷率的差异无统计学意义。各组间累积活产率的差异有统计学意义（P<0.05），超重组显著高于正常组。随访到的75例患者中，妊娠期高血压25例，妊娠合并糖尿病22例（两并发症中超重和肥胖分别占60.00%、45.40%）。结论 女性不同BMI与IVF/ICSI结局存在显著关联。极低体质量患者孕前体质量评估应予以重视；超重和肥胖患者的活产率较正常体质量组相当，但仍建议这类人群治疗前积极减重，减少流产、早产和妊娠并发症的发生率。
宫腔镜检查对遗传学检测胚胎移植结局的影响
夏金铃;郝燕;陈大蔚;周平;目的 对行胚胎植入前遗传学检测（PGT）助孕的患者，比较宫腔镜检查及处理对遗传学检测胚胎移植结局的影响。方法 回顾性分析行体外受精（IVF）助孕的261个移植周期和PGT助孕的267个移植周期，其中IVF助孕移植周期分为胎移植前行宫腔镜检查组（IVF-H组）共134个周期，胚胎移植前未行宫腔镜检查组（IVF-N组）共127个周期；PGT助孕移植周期分为胚胎移植前行宫腔镜检查组（PGT-H组）有140个周期，胚胎移植前未行宫腔镜检查组（PGT-N组）共127个周期，分别分析比较IVF-H、IVF-N两组及PGT-H、PGT-N两组的一般情况及妊娠结局。结果IVF-H、IVF-N两组间及PGT-H、PGT-N两组间年龄、BMI及基础激素水平差异无统计学意义，IVF-H组的生化妊娠率、临床妊娠率及活产率略高于IVF-N组（P>0.05），早期流产率小于IVF-N组（P>0.05），但差异均无统计学意义。PGT-H组的生化妊娠率及临床妊娠率均高于PGT-N组（P<0.05）。PGT-H组及PGT-N组的早期流产率近似（P>0.05）。PGT-H组的活产率高于PGT-N组，但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 宫腔镜检查可提高临床妊娠率、活产率，PGT助孕患者妊娠改善幅度优于IVF助孕人群。
司美格鲁肽调节AMPK/NLRP3信号通路对大鼠冠状动脉微栓塞致心肌损伤的影响
刘阳春;杨华锋;黄万众;黄源;苏强;目的 基于腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）信号通路探讨司美格鲁肽（SEM）对大鼠冠状动脉微栓塞（CME）致心肌损伤的影响。方法 选择存活的32只大鼠随机分为假手术（Sham）组、CME组、CME+SEM组、CME+SEM+CompoundC（CC，AMPK抑制剂）组，每组8只；将微栓塞球从左心室注入构建CME模型；从左心室注入生理盐水为Sham组；CME+SEM组在CME造模前4周，采用SEM进行皮下注射，剂量为1 mg/kg，每周1次，连续4周；在CME+SEM+CC组中，大鼠在CME造模前接受为期4周的SEM治疗，在CME造模前30min，通过尾静脉注射给予CC（0.25 mg/kg，溶于无菌水）。各组在造模后24h分别进行以下检测：应用心脏超声评估心功能；通过HE染色观察心肌组织的病理变化；利用Heidenhain染色测定心肌微梗死面积；采用ELISA法检测血清中心肌肌钙蛋白T（cTnT）水平；通过Westernblot分析心脏组织中AMPK/NLRP3通路相关蛋白的表达情况。结果 与Sham组比较，CME组心功能显著下降，血清cTnT水平显著升高，心肌微梗死面积显著增加（P<0.05）；与CME组比较，CME+SEM组心功能得到显著改善，cTnT水平降低，心肌微梗死面积明显减少（P<0.05）。Sham组心肌组织形态结构正常，未见明显梗死灶；CME组心肌排列疏松，部分细胞核发生核碎裂，核溶解；SEM组心肌变性、水肿及炎症细胞浸润得到缓解。与Sham组比较，CME组p-AMPK/AMPK蛋白比值略有升高，NLRP3、消皮素D-N端（GSDMD-N）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 p20亚基（caspase-1p20）、白细胞介素（IL）-1β、IL-18等蛋白水平均显著上调（P<0.05）；与CME组比较，CME+SEM组p-AMPK/AMPK蛋白比值进一步增加，NLRP3、GSDMD-N、ASC、caspase-1p20、IL-1β、IL-18等蛋白水平均显著下降（P<0.05）。结论 SEM能够显著改善CME引发的心肌损伤，其作用机制可能与促进AMPK磷酸化、减少NLRP3炎症小体介导的炎症反应以及细胞焦亡密切相关。
生长激素预处理对卵巢储备功能减退患者IVF/ICSI-ET临床结局的影响
韩丹;徐祖滢;汪诗羽;倪小晴;周平;曹云霞;目的 研究生长激素（GH）预处理对卵巢储备功能减退（DOR）患者行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植技术（IVF/ICSI-ET）助孕临床结局的影响。方法 回顾性分析359例DOR患者行IVF/ICSI-ET助孕的临床资料，按照促排卵之前是否使用GH预处理及仅在促排卵过程中添加或不添加GH分成3组：促排卵前及促排卵过程中均未使用GH者为对照组（n=119）；促排卵前未使用GH预处理，但促排卵过程中添加GH4IU/d者为非GH预处理组（n=115）；促排卵前4～6周使用GH2IU/d预处理，且促排卵过程中使用GH4IU/d者为GH预处理组（n=125）。观察比较3组患者基本资料、促排卵相关资料、胚胎情况及累积活产率（CLBR）。结果①3组患者女方年龄、男方年龄、不孕年限、体质量指数（BMI）、基础性激素水平、不同促排卵方案占比、HCG日内膜厚度、雌二醇（E2）、黄体生成素（LH）水平、每周期移植囊胚数差异均无统计学意义。② GH预处理组促性腺激素（Gn）使用总剂量、Gn总天数显著少于对照组与非GH预处理组（P<0.05）；GH预处理组获卵数、成熟卵子数、双原核（2PN）受精数、2PN卵裂数、可移植囊胚数、优质囊胚数、累积临床妊娠率、CLBR均显著高于对照组（P<0.05）；与非GH预处理组相比，GH预处理组可移植囊胚数、优质囊胚数、CLBR均显著增多（P<0.05）。③ 与对照组相比，非GH预处理组仅获卵数明显增多（P<0.05），但成熟卵子数、2PN受精数、2PN卵裂数、可移植囊胚数、优质囊胚数、累积临床妊娠率、CLBR差异均无统计学意义。结论 对于DOR患者，促排前使用GH预处理4～6周可以改善获卵数、胚胎质量，提高累积临床妊娠率、CLBR，改善体外受精胚胎移植助孕的临床结局。
犬尿氨酸-3-单加氧酶对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞功能的影响
贾永平;宗雪梅;汪艳楠;汪文莉;王越业;魏伟;常艳;目的 探讨犬尿氨酸-3-单加氧酶（KMO）对类风湿关节炎（RA）成纤维样滑膜细胞（FLS）功能的影响。方法 通过生物信息学分析RA和健康对照（HC）组滑膜组织KMO表达；收集RA患者和HC滑膜组织，免疫荧光（IF）检测滑膜组织FLS中KMO表达情况；体外利用人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（MH7A），对MH7A进行过表达、敲低及KMO特异性抑制剂Ro61-8048抑制KMO后，通过Westernblot、CCK-8、EdU、Transwell和ELISA等方法检测MH7A细胞活力、增殖、迁移及分泌功能的变化。结果 生物信息学分析表明，RA滑膜组织KMO基因表达显著高于HC组（P<0.001）；IF结果显示，与HC组相比，RA滑膜组织FLS中KMO表达增加（P<0.01）；过表达KMO后，MH7A细胞活力、增殖、迁移和分泌能力增强（均P<0.05）；MH7A细胞敲低和Ro61-8048抑制KMO后，显著抑制MH7A细胞活力、增殖、迁移和分泌能力（均P<0.05）。结论 KMO在RA滑膜组织中表达上调，并促进RA-FLS活化，可能是RA治疗的潜在靶点。
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